■試験概要

マクロファージ細胞株の培養液に検体を添加し、24時間後の培養上清を回収します。RNAを抽出してサイトカインの遺伝子発現を解析するか、または市販のELISAキットによりサイトカインのタンパク質を定量します。LPSの作用を排除したい場合は、依頼サンプルをTLR4欠損マウス（C3H/HeJ）の腹腔マクロファージを用いて測定します。あるいは、依頼サンプルをポリミキシンBと混合し、NO産生能を測定します。

■試験の意義

マクロファージ等の自然免疫担当細胞は、活性化されると種々のサイトカインを産生します。代表的なサイトカインとして、TNF、インターロイキン、インターフェロンなどがあり、これらのサイトカイン産生量をPCRまたはELISA（Enzyme linked immune solvent assay）によって、測定あるいは比較することで、自然免疫の活性化能を調べることができます。

■実施例

※マウスマクロファージ細胞株（RAW264.7）をLPS（10ng/mL）で4時間刺激した後、RNAを抽出し、各種サイトカインとTLR4の遺伝子発現量をPCRにて調べた。無刺激コントロールと比較した誘導量をレーダーチャートにまとめた。スケールはログ表示となっている。

■納期

細胞、検体、試薬が揃ってから1か月が目安です。

■注意事項

• 検体は培養液に添加して試験しますので、無菌状態でご提供ください。
• 細胞障害性を有する検体は、細胞障害性を調べる試験を一緒に行うことをお勧めします。
• LPSを含む検体は、LPS含量を確認する試験を行った上、LPSの作用を抑制するポリミキシンB有無での測定を行うことをお勧めします。