【貪食活性試験】

貪食機能を指標として、依頼サンプルのマクロファージ活性化能を評価します。具体的にはマクロファージ細胞株（RAW246.7、NR8383、J774.1等）培養液中に依頼サンプルを添加し、回収した細胞に蛍光ラテックスビーズまたはザイモザンなどを貪食させて、貪食したマクロファージ の割合、貪食した粒子数を計測します。

J774.1細胞にラテックスビーズを貪食させた後、洗浄し、ギムザ染色した。矢印：ビーズ

【NO産生試験】

NO産生能を指標として、依頼サンプルのマクロファージ活性化能を評価します。

マクロファージ細胞株（RAW246.7、NR8383、J774.1等）培養液中に依頼サンプルを添加し、24～72時間後の培養上清を回収します。NO産生能として、上清中の亜硝酸量をグリエス試薬を用いて測定します。LPSの作用を排除したい場合は、依頼サンプルをTLR4欠損マウス（C3H/HeJ）の腹腔マクロファージを用いて測定します。あるいは、依頼サンプルをポリミキシンBと混合し、NO産生能を測定します。

ラット末梢血から単球を回収し、大腸菌由来のLPSを各濃度（0.01～100ng/ml）添加し、24時間後の培養上清を回収した。グリエス試薬を用いて、上清中の亜硝酸量を測定した。

【TNF産生試験】

TNF産生能を指標として、依頼サンプルのマクロファージ活性化能を評価します。具体的には、マクロファージ細胞株（RAW246.7、NR8383、J774.1等）培養液中に依頼サンプルを添加し、3～24時間後の上清を回収します。上清中のTNF量はELISAによる測定の他、L-929細胞傷害試験も対応できます。

NR8383細胞に大腸菌由来のLPSを各濃度（0.1～1000ng/ml）添加し、3時間後の培養上清を回収した。L-929細胞傷害試験（アクチノマイシンD存在下）試験でTNF産生量を測定した。